预冻篇（二）：退火 （Annealing）

一、概述退火是在预冻过程中常用的操作方法。通过退火操作，可以提高批次产品均一性、缓解结壳现象、减轻碎瓶现象，甚至大大提高某些产品的塌陷温度。01.退火的过程•在样品的预冻阶段，将冷冻的样品加热到一个高于玻璃态转变温度，低于初始融化温度的温度。•产品在这个温度下保持（几个小时）使得其进行重结晶（大冰晶数量增加，小冰晶数量减少）。•再次降低温度，降到需要的预冻温度。•通过这个方法，可以减少样品中无定形物质的比例。02.退火冻干曲线示例03.退火的优缺点优点：•晶体比例增加使得一次...

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Nature子刊新文解析结核分枝杆菌DNA修复机制，FIDA技术助力蛋白寡聚化研究

近日，《Naturecommunications》发表了一项关于结核分枝杆菌DNA修复机制的重要研究，揭示了DNA诱导的Ku蛋白寡聚化是细菌非同源末端连接（Non-homologousendjoining,NHEJ）修复的核心机制。在这项工作中，研究团队借助FIDA（层流诱导分散分析）技术，在近生理溶液环境中完整解析了Ku-Mtb蛋白结合DNA进而发生寡聚化组装的全过程，为阐明细菌NHEJ的分子机制提供了重要的实验证据。01.研究速览DNA双链断裂修复是细菌维持基因组稳定的关...

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蛋白稳定第一步：pH与缓冲液的关键作用与选择指南

任何蛋白生物物理学检测均需构建于合格的液体体系基础之上——尤其在纯化、洗脱、配制及检测环节，始终无法脱离液体环境。在液体体系内，pH和缓冲液是两类看似基础，却很容易带来开发风险的核心变量。在蛋白质制剂体系中，pH和缓冲液的作用更接近“隐形调控因子”：调整pH不单单是改变一个数值参数，还会对蛋白质体系的电荷分布、分子间相互作用、化学反应活性以及界面行为起到系统性的调控作用。缓冲液本身也不是体系的惰性背景，当研究人员调整pH或者更换缓冲体系时，往往会同时改变以下四类性质：(1)蛋...

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冻干机的压力控制详解 —— 波动篇

前言冷冻干燥工艺中，产品温度Tp是决定最终产品质量和工艺时间的最重要因素之一。一次干燥阶段，产品温度（升华界面温度）需低于其塌陷温度Tc（无定形处方）或共晶点温度(晶体处方)。如产品温度（升华界面温度）高于关键温度，则会引起塌陷或者熔融。然而，如产品温度（升华界面温度）过低，则一次干燥时间会相应大幅延长。一次干燥阶段，产品温度（升华界面温度）每升高1℃，则一次干燥时间可缩短13%。一次干燥阶段产品温度既影响到产品最终质量指标（水分、复溶时间、活性）又影响到冻干工艺的时长，是最...

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冻干过程中的真空控制

概要冻干过程中，真空度控制是否精准平稳，是考察冻干机硬件能力的重要指标之一。同时，因为一次干燥时的真空度，直接影响产品升华界面温度。因此精准平稳的控制真空度，对于一次干燥过程至关重要。冻干机内的压力控制，可以通过两个途径来实现，渗气（上游真空控制）和下游真空控制。本文将会详细讲解两种方式的机械原理以及优缺点。一、下游真空控制通过真空泵和冷井之间的阀门，对真空度进行控制：通过安装在真空泵和冷井之间的电磁阀，对真空度进行控制。通过这个阀门的开、关来控制腔体内的真空度。控制出来的真...

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