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微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测”的极限?

更新时间:2026-09-16点击次数:16

01.  微量样品做WB,谁还没踩过这几个坑?


在生物医药研究中,总有一些“金贵"的样品:


•  流式分选出来的干细胞,就那么几千个

•  穿刺活检得到的临床样本,每一微升都珍贵

•  外泌体、胚胎、显微切割的特定细胞群……蛋白量少得可怜


这时候,传统WB往往会给你一个“灵魂拷问":“样品量不够,没法做。"


传统WB在微量样品面前,有三大“劝退"理由:

微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测


结果就是:要么放弃实验,要么牺牲动物重复采样,耗时耗力还心疼。



02.  Digital WB(JESS):为微量样品而生


JESS 是一款基于毛细管电泳的全自动蛋白质定量检测系统。它把传统WB的所有步骤 —— 跑胶、转膜、杂交、检测、分析 —— 全部塞进一根毛细管里自动完成

微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测


关键是:它特别“省吃俭用"

微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测


一句话总结:别人吃一碗饭才饱,JESS吃一口就够了



03.  JESS如何破解微量样品检测难点?


案例1:1000个骨髓干细胞 → 检出GAPDH

•  样本来源:转基因小鼠流式分选的骨髓干细胞

•  样品量:约1000个细胞

•  检测结果:成功检测到整合素β2(integrin β2)及内参GAPDH的清晰信号,证实β2缺失会显著影响粒细胞/巨噬细胞祖细胞的增殖能力

微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测


传统WB:需要数万个细胞,需牺牲数十只小鼠。

JESS:一只小鼠就够了,费用只有传统方法的几十分之一。

* 文献来源:The impact of integrin β2 on granulocyte/macrophage progenitor proliferation. STEM CELLS. 2018


案例2:0.5μg外泌体总蛋白 → 成功检测

•  样本来源:TNF-α预刺激的牙龈间充质干细胞来源外泌体(TG-exo)

•  样品量:约0.5μg总蛋白(上样浓度约0.1μg/μL)

•  检测结果:(TG-exo)用于视网膜缺血再灌注损伤治疗,证实其通过 MEG3/miR-21a-5p/PDCD4 轴发挥神经保护作用

微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测


传统WB:外泌体蛋白量极低,常规方法难以检出。

JESS:微量外泌体样本也能稳定检测出内参和目的蛋白两个条带。

* 文献来源:Ziyu Yu, et al., TNF-α stimulation enhances the neuroprotective effects of gingival MSCs derived exosomes in retinal ischemia-reperfusion injury via the MEG3/miR-21a-5p axis, Biomaterials (IF: 15.30), 2022.


附:外泌体团体标准收录“全自动数字化WB法"

2024年发布的《干细胞外泌体载药技术规范》团体标准中,全自动数字化Western Blot法(JESS)被正式列为外泌体蛋白质标志物检测的推荐方法(见第6.1.3条及附录D),标志着该技术已获得行业认可。

微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测


案例3:临床心衰患者心肌活检 → 稀缺临床样本

•  样本来源:心衰病人心肌内膜活检样本

•  样品量:临床穿刺样本,极其有限

•  检测结果:成功检测到与硝化应激相关的多种蛋白表达变化

微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测


传统WB:临床活检样本量太少,难以满足传统WB需求。

JESS:已有多项临床试验采用JESS进行稀缺样本分析。

* 文献来源:Nitrosative stress drives heart failure with preserved ejection fraction. Nature


案例4:132个2-cell胚胎 → 同时检测3个靶蛋白

•  样本来源:小鼠2-cell胚胎

•  样品量:132个胚胎(7μL裂解物)

•  检测内容:成功检测到H3K4me3、H3K27me3及内参Histone H3三个靶蛋白。证实这三个靶蛋白在合子基因组激活过程中发挥关键调控作用

微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测


传统WB:胚胎样本极其珍贵,传统方法根本无法检测。

JESS:一百多个胚胎就能同时检测多个靶点。

* 文献来源:Broad histone H3K4me3 domains in mouse oocytes modulate maternal-to-zygotic-transition. Nature


案例5:0.1μg膜蛋白 → 信号清晰

•  样本来源:干燥症模型中的细胞膜紧密连接蛋白claudin-5

•  样品量:约0.1μg总蛋白

•  检测结果:成功检测到claudin-5蛋白表达的下调。证实内皮屏障功能破坏与干燥综合征患者唾液腺的分泌功能减退及淋巴细胞浸润密切相关


微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测


传统WB:膜蛋白丰度低,常规检测困难。

JESS:低至0.1μg仍可获得清晰信号。

* 文献来源:Disruption of endothelial barrier function is linked with hyposecretion and lymphocytic infiltration in salivary glands of Sjögren‘s syndrome. Molecular Basis of Disease.



04.  JESS为什么能“吃这么少,干这么多"?


背后是几项硬核技术:

微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测

一句话总结 —— JESS把每一微升样品都用到了



05.  哪些场景适合用JESS?


微量样品蛋白检测不再难 —— Digital WB 如何撬动“不可测



06.  样品少不是问题,找对方法就行


JESS 全自动 Digital WB 检测服务,现已落地上海昊扩科技实验室。如果您正在为微量样品发愁 ——

•  干细胞、流式分选细胞

•  外泌体、穿刺活检样本

•  胚胎、原代细胞、稀有细胞群


上海昊扩科技实验室已正式引入 ProteinSimple JESS 全自动 Digital CE-Western 系统,提供:

•  全流程自动化检测服务(无需人工制胶、转膜、显影)

•  仅需 3~5 μL 样品,可检测 1000个细胞

•  支持 外泌体、活检样本、神经细胞等稀缺样品

•  自动数据分析,结果重复性高、不受人为干扰


服务形式:

•  预实验 + 正式实验

•  一个泳道一个靶点,清晰、可重复、可发表


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“您来,我就能检。"—— 让每一份微量样本,都能发出可靠的信号。



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R&D Systems™ 是美国Bio-Techne 集团旗下蛋白质分析试剂与仪器的核心市场化品牌,为全球科研工作者提供高品质的蛋白、抗体、免疫检测试剂盒、小分子化合物及创新分析仪器。原 ProteinSimple™ 品牌现已全面归入 R&D Systems™ 旗下。


作为 R&D Systems™(原ProteinSimple)仪器耗材的华东大区(江浙沪皖山东)授权代理商,上海昊扩将为您的蛋白质分析研究提供精准、快速、灵敏的自动化分析工具和技术支持服务。


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